UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO

INSTITUTO DE QUÍMICA

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA

BIOLOGIA MOLECULAR

QBQ2456

 

 

Créditos: 04

Objetivos: Fornecer uma visão integrada dos princípios gerais de Biologia Molecular visando compreender os mecanismos moleculares que determinam a organização e expressão do genôma de um organismo.

Metodologia e conteúdo: As aulas expositivas serão seguidas pela resolução de exercícios pelos alunos. Os exercícios serão discutidos pelo grupo com o auxílio de monitores. O curso também contará com aulas práticas e preparação de relatórios das mesmas. Os seguintes tópicos serão abordados: Estrutura e propriedades dos ácidos nucléicos; o código genético e a estrutura gênica; replicação, mutação e reparo do DNA; Transcrição; Tradução; Controle da Expressão Gênica; Tecnologia do DNA Recombinante e Biotecnologia; Transdução de Sinal e Câncer.

Avaliação: Duas provas serão realizadas que versarão sobre o conteúdo das aulas expositivas e aulas de exercícios. Uma prova substitutiva será aplicada para alunos que tenham sido impossibilitados de fazer uma das provas por motivo de doença e incluirá toda a matéria do curso. Um atestado médico deverá ser entregue neste caso. A nota final será ponderada dando-se peso 4 a cada uma das provas e peso dois a média da nota dos 3 relatórios. Será considerado aprovado o aluno com nota superior ou igual a 5.0.

 

Roteiro para as Aulas Práticas

Recomendações:

1. Por razões de segurança não será permitido ao aluno frequentar as aulas sem avental. É proibido comer, beber e fumar no laboratório.

2. Leia com detalhe o protocolo e preste atenção as instruções fornecidas antes de iniciar a experiência.

3. Procure utilizar reagentes, vidraria e equipamentos disponíveis com cuidado, para evitar desperdício e quebra.

4. Mantenha sua área de trabalho organizada. Ao terminar a experiência passe água na vidraria utilizada e coloque à no local indicado.

5. O relatório em grupo deverá ser entregue no final de cada uma das aulas práticas. O relatório deverá ser feito de acordo com modelo ao final de cada protocolo experimental. Após preenchidas, as respectivas folhas devem ser destacadas e entregues.

6. Qualquer dúvida ou acidente peça auxílio aos monitores ou aos professores.

 

 

uso do avental nas aulas práticas

é obrigatório.

 

PROPRIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DOS ÁCIDOS NUCLEICOS

 

DNA

RNA

Força iônica

baixa ("Salting in")

alta ("salting out)

 

Solubiliza

Precipita

 

Solubiliza

Precipita

Meio ácido 0,5N

(brando) à frio

Precipita

Depurina

Precipita

Depurina

Meio alcalino brando

(0,3N KOH; 37° C; 18h)

ss: estável

ds: desnatura

Hidrolisa

2' e 3'nucleosídeos

Solvente orgânico

(cte dieletr. < que da H2O)

ex.: etanol, isopropanol

 

Precipita

 

Precipita

Agentes desnaturantes

quebram pontes de H

ex.: formamida, uréia

ss: estável

ds: desnatura

1ária: estável

2ária: destruída

Luz UV (260 nm)

ss: absorve mais

ds: absorve menos

Absorve

Calor

ss: estável

ds: desnatura (Tm)

1ária: estável

2ária: destruída

Nucleases

Exonucleases

+

+

 

Endonucleases

+

+