UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO
INSTITUTO DE QUÍMICA
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
BIOLOGIA MOLECULAR
QBQ2456
Créditos: 04
Objetivos: Fornecer uma visão integrada dos princípios gerais de Biologia Molecular visando compreender os mecanismos moleculares que determinam a organização e expressão do genôma de um organismo.
Metodologia e conteúdo: As aulas expositivas serão seguidas pela resolução de exercícios pelos alunos. Os exercícios serão discutidos pelo grupo com o auxílio de monitores. O curso também contará com aulas práticas e preparação de relatórios das mesmas. Os seguintes tópicos serão abordados: Estrutura e propriedades dos ácidos nucléicos; o código genético e a estrutura gênica; replicação, mutação e reparo do DNA; Transcrição; Tradução; Controle da Expressão Gênica; Tecnologia do DNA Recombinante e Biotecnologia; Transdução de Sinal e Câncer.
Avaliação: Duas provas serão realizadas que versarão sobre o conteúdo das aulas expositivas e aulas de exercícios. Uma prova substitutiva será aplicada para alunos que tenham sido impossibilitados de fazer uma das provas por motivo de doença e incluirá toda a matéria do curso. Um atestado médico deverá ser entregue neste caso. A nota final será ponderada dando-se peso 4 a cada uma das provas e peso dois a média da nota dos 3 relatórios. Será considerado aprovado o aluno com nota superior ou igual a 5.0.
Roteiro para as Aulas Práticas
Recomendações:
1. Por razões de segurança não será permitido ao aluno frequentar as aulas sem avental. É proibido comer, beber e fumar no laboratório.
2. Leia com detalhe o protocolo e preste atenção as instruções fornecidas antes de iniciar a experiência.
3. Procure utilizar reagentes, vidraria e equipamentos disponíveis com cuidado, para evitar desperdício e quebra.
4. Mantenha sua área de trabalho organizada. Ao terminar a experiência passe água na vidraria utilizada e coloque à no local indicado.
5. O relatório em grupo deverá ser entregue no final de cada uma das aulas práticas. O relatório deverá ser feito de acordo com modelo ao final de cada protocolo experimental. Após preenchidas, as respectivas folhas devem ser destacadas e entregues.
6. Qualquer dúvida ou acidente peça auxílio aos monitores ou aos professores.
uso do avental nas aulas práticas
é obrigatório.
PROPRIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DOS ÁCIDOS NUCLEICOS
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DNA |
RNA |
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Força iônica baixa ("Salting in") alta ("salting out) |
Solubiliza Precipita |
Solubiliza Precipita |
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Meio ácido 0,5N (brando) à frio |
Precipita Depurina |
Precipita Depurina |
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Meio alcalino brando (0,3N KOH; 37° C; 18h) |
ss: estável ds: desnatura |
Hidrolisa 2' e 3'nucleosídeos |
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Solvente orgânico (cte dieletr. < que da H2O) ex.: etanol, isopropanol |
Precipita |
Precipita |
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Agentes desnaturantes quebram pontes de H ex.: formamida, uréia |
ss: estável ds: desnatura |
1ária: estável 2ária: destruída |
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Luz UV (260 nm) |
ss: absorve mais ds: absorve menos |
Absorve |
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Calor |
ss: estável ds: desnatura (Tm) |
1ária: estável 2ária: destruída |
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Nucleases |
Exonucleases |
+ |
+ |
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Endonucleases |
+ |
+ |
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